A FRET modification using the donor fluorophore as the light source
TECHNOLOGY
BRET是FRET的一種修改,主要區別在於供能螢光素酶(供體)被火蟲素酶(luciferase)所取代。BRET的一個主要應用是用於相互作用研究。其優點是無需激發光,因此背景信號要低得多。BRET本身是一種技術,因此無法商業化。然而,各種公司提供了專有的此技術的試劑組分,例如BRET1/3/e是一種未經許可的技術,而BRET2是PerkinElmer的一項經許可的產品。
BRET1和BRET2之間的區別在於供體和受體蛋白/螢光素酶的選擇(見圖1)。這導致了激發光和發射光波長的變化。
一個新的改進版本的BRET,稱為NanoBRET™,結合了極亮的NanoLuc® luciferase和一種用於標記細胞內蛋白質的長波長螢光素酶(HaloTag),提供了更好的動態範圍和靈敏度。
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