光被吸收，轉移到另一種螢光劑，然後被發射出來
TECHNOLOGY
正如名稱所暗示的，FRET涉及兩個螢光分子之間的能量轉移（圖1）。然而，要使這種轉移發生，有一些特定的要求。首先，供體螢光劑的發射光譜和受體螢光劑的激發光譜需要重疊（圖2），因為供體螢光劑的發射光用於激發受體螢光劑。其次，兩個螢光分子之間的距離 - Förster半徑 - 應小於10納米（圖3）。
FRET的一種應用是確定兩個生物分子是否靠近。在這種情況下，兩個生物分子必須標記有螢光劑，然後結合在一起。經過一段孵育時間後，執行試驗。樣本在供體的激發波長下激發，並在供體和受體的發射波長下測量。為了補償不同孔之間的變異性，例如由於吸液錯誤，計算了兩個值的比值（比值法試驗）。如果供體和受體靠近，FRET將發生，否則只有供體的發射信號可測量。
Major applications
• GeneBLAzer and Tango™ GPCR Assay System
SUPPORT
Links
• http://lifesciences.tecan.com/multimode-plate-reader?p=Technology
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