Life Technologies' version of the ADP detection assay
ASSAY OVERVIEW
Technology
Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer (TR-FRET),
ratiometric
原理、供應商、主要應用
Life
Technologies的Adapta
Universal Kinase Assay Kit是一種均相的、基於螢光的免疫分析方法,用於測量產生ADP的酶(主要是激酶)的活性。此外,Adapta測試還可用於一些基於脂質和肽的底物的選擇性。Life
Technologies供應特定於ADP的釷耦合抗體。與Transcreener®平台不同,Adapta僅適用於ADP。
機制
將特定於ADP的抗體和追蹤劑加入樣本中。在受抑制的反應中(見圖1),被監測的激酶不產生ADP,只有添加的、與追蹤劑結合的ADP分子結合到抗體上,導致高FRET信號。
活躍的激酶將ATP轉化為ADP。自由的ADP競爭與追蹤劑結合的ADP,以結合抗體,導致低FRET信號。因此,信號強度間接與激酶的活性成反比。
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