MTT/MTS assay 細胞活性分析

 使用吸收光判讀做細胞活性與細胞毒性分析

Figure 1: MTT assay in a 96-well format

ASSAY OVERVIEW

Technology

Absorbance吸收光

原理

　　MTT和MTS試驗是顏色測量（圖1） - 因此是吸光度 - 用於測量細胞存活率的試驗。細胞吸收MTT / MTS並根據細胞的存活率程度進行不同程度的處理。存活細胞會還原更多的MTS / MTT以生成偶氮偶氮化合物，產生更濃烈的紫色。

機制

　　MTT試驗需要使用一種試劑來使生成的偶氮偶氮化合物可溶解，而MTS試驗生成水溶性產物，可能使它們成為均質試驗。MTT試驗使用一種可溶解非水溶性偶氮偶氮化合物產物的溶解劑，例如二甲亞砜（DMSO）或異丙醇，生成一種有色溶液，可根據吸光度測量在大約565 nm處進行定量測量，具體取決於所使用的溶劑。

　　MTS試驗是MTT試驗的改進版本。它的試劑在細胞內的還原效率比MTT更高，產生的產物是水溶性的，比MTT試驗中使用的不溶性偶氮偶氮化合物的毒性小。這使得它成為一種一步（均質）試驗，具有將試劑直接添加到細胞培養中而無需MTT試驗中所需的間歇步驟的便利性。

　　然而，當MTS以均質方式使用時，試驗會變得容易受到色度干擾，因為微量盤中可能殘留有色化合物的痕跡。

替代方案

除了基於吸光度的細胞存活率試驗之外，還有使用氧化還原指示劑Resazurin來檢測細胞的代謝活性的基於螢光的系統。這些試驗的特點是試劑處理更加便利，靈敏度水平更高。